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      中藥成分液相分析常見問題——前沿峰

      更新時間:2022-09-05 點擊次數:1360


      01

      造成前沿峰的原因


      1. 柱過載

      每一根色譜柱都有其最大樣品承載量,當樣品量過多時會出現超載現象,包括質量過載和體積過載。

      2.色譜柱損壞

      色譜柱在長時間使用之后就會導致硅膠填料的溶解,柱床崩解,從而柱效降低導致峰前沿。

      3.峰干擾

      兩個化合物共洗脫,即在大峰前有小峰出現,色譜峰沒有分開。

      4.樣品溶劑的影響

      當樣品溶劑的洗脫能力大大強于流動相時會出現前沿峰。

      具體就是說,樣品在色譜柱中均勻的往前移,我們通常會得到呈正態分布的的峰。當樣品溶液進樣后到達色譜柱的時間比較短,在未被流動相充分稀釋時,由于洗脫能力比較強的樣品溶劑存在,使部分樣品被洗脫的速度加快,快速通過色譜柱,最終導致峰前延。

      中藥成分分析項目中,提取溶劑通常為乙醇、甲醇、乙酸乙酯等洗脫強度較強的溶劑,此時易發生“樣品溶劑的洗脫強度遠遠超過流動相"的情況,為避免前延峰出現,可以用通過“流動相稀釋提取液"或降低“進樣體積"的方式。


      02

      應用案例

      蒡子的含量測定

      色譜條件:

      色譜柱:Ultimate® AKL-C18(4.6×250mm,5μm)。

      流速:1.0mL/min;

      流動相:甲醇:水=1:1.1;

      檢測波長:280nm;

      柱溫:30℃;

      進樣體積:10μL。

      色譜圖:

      (1) 標準品


      微信截圖_20220905144655.png

      結論:牛蒡苷峰形前沿,將進樣體積降低至5μL,結果如下:


      (1) 標準品


      微信截圖_20220905144705.png

      (2) 供試品

      微信截圖_20220905144741.png

      結論:通過降低進樣體積有效改善了牛蒡苷的峰形,結果可滿足《中國藥典2020版》中相關要求。


      03

      產品信息


      微信截圖_20220905144800.png


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